Kullanım amacı

Dengue NS1 Ag-IgG/IgM Kombo Testi, Dang humması viral enfeksiyonunun tanısına yardımcı olmak için Serum veya Plazmadaki dang virüsüne karşı antikorların (IgG ve IgM) ve dang virüsü NS1 antijeninin kalitatif tespiti için hızlı bir kromatografik immünolojik testtir.

[ÖZET]

Dang humması, sivrisinekler tarafından bulaşan dang virüsünün neden olduğu, vektör kaynaklı akut bir bulaşıcı hastalıktır.Dang virüsü enfeksiyonu resesif enfeksiyona, dang hummasına, dang hemorajik ateşine, dang hemorajik ateşine yol açabilir.Dang hummasının tipik klinik belirtileri arasında ani başlangıç, yüksek ateş, baş ağrısı, şiddetli kas, kemik ve eklem ağrısı, deri döküntüsü, kanama eğilimi, lenf nodu büyümesi, bazı hastalarda beyaz kan hücresi sayısında azalma, trombositopeni vb. yer alır.Bu hastalık temel olarak tropikal ve subtropikal bölgelerde popülerdir, çünkü bu hastalık Aides sivrisineği tarafından bulaşır, bunun nedeni popülerliğin mevsimsel olarak belirli olmasıdır, her yıl genellikle Mayıs ~ Kasım aylarında olur, zirve Temmuz ~ Eylül aylarındadır.Yeni salgın bölgesinde popülasyon genel olarak duyarlıdır, ancak görülme sıklığı esas olarak yetişkinlerde görülürken, endemik bölgede görülme sıklığı esas olarak çocuklarda görülür.

Prensip

Dengue NS1 Ag-IgG/IgM Kombo Testi, Serum veya Plazmadaki dang virüsü antikorlarının (IgG ve IgM) ve dang virüsü NS1 antijeninin saptanmasına yönelik kalitatif bir membran şerit bazlı immünolojik testtir.

IgG/IgM Testi için: Test cihazı şunlardan oluşur: 1) Kolloid altın (dang konjugatları) ile konjuge edilmiş dang humması rekombinant zarf antijenleri içeren bordo renkli bir konjuge ped, 2) iki test çizgisi (T1 ve T2 çizgileri) içeren bir nitroselüloz membran şeridi ve bir kontrol hattı (C hattı).T1 çizgisi, IgM anti-dangue'in saptanması için antikorla önceden kaplanmıştır, T2 çizgisi, IgG anti-dangue'in saptanması için antikorla kaplanmıştır.Test kasetinin numune bölmesine yeterli miktarda test numunesi dağıtıldığında numune, kapiler hareketle kaset boyunca hareket eder.Numunede mevcutsa, dang karşıtı IgG, dang konjugatlarına bağlanacaktır.Daha sonra immün kompleks, T2 bandı üzerinde önceden kaplanmış reaktif tarafından yakalanır ve bordo renkli bir T2 çizgisi oluşturarak dang IgG pozitif test sonucunu gösterir ve yakın zamanda geçirilmiş veya tekrarlanan bir enfeksiyon olduğunu gösterir.Örnekte mevcutsa, dang karşıtı IgM, dang konjugatlarına bağlanacaktır.İmmün kompleks daha sonra T1 çizgisi üzerinde kaplanmış reaktif tarafından yakalanır ve bordo renkli bir T1 çizgisi oluşturur, bu da dang IgM pozitif test sonucunu gösterir ve yeni bir enfeksiyon olduğunu gösterir.Herhangi bir T çizgisinin (T1 ve T2) yokluğu negatif bir sonuca işaret eder.

NS1 Testi için: Bu test prosedüründe, Dang karşıtı NS1 antikoru kasetin test çizgisi bölgesinde hareketsiz hale getirilir.Tam Kan/Serum/Plazma numunesi numune kuyusuna yerleştirildikten sonra numune pedine uygulanan Dengue karşıtı NS1 antikor kaplı parçacıklarla reaksiyona girer.Bu karışım, test şeridinin uzunluğu boyunca kromatografik olarak hareket eder ve hareketsizleştirilmiş Dengue karşıtı NS1 antikoru ile etkileşime girer.Örnek, dang virüsü NS1 antijeni içeriyorsa test çizgisi bölgesinde pozitif sonucu gösteren renkli bir çizgi görünecektir.Örnek, dang virüsü NS1 antijeni içermiyorsa bu bölgede negatif sonucu gösteren renkli bir çizgi görünmeyecektir.

Prosedürel bir kontrol görevi görmek üzere, kontrol çizgisi bölgesinde her zaman uygun miktarda numunenin eklendiğini ve membran fitilinin oluştuğunu belirten renkli bir çizgi görünecektir.

Depolama ve Stabilite

Oda sıcaklığında veya buzdolabında (4-30°C veya 40-86℉) kapalı poşette paketlenmiş olarak saklayın.Test cihazı, kapalı poşetin üzerinde yazılı olan son kullanma tarihine kadar stabildir.

Test, kullanılıncaya kadar kapalı poşette kalmalıdır.

Numune Toplama ve Hazırlama

1. Dengue NS1 Ag-IgG/IgM Kombo Testi Serum veya Plazma üzerinde yapılabilir.

2. Düzenli klinik laboratuvar prosedürlerini takip ederek tam kan, serum veya plazma örnekleri toplamak.

3. Test, numune toplandıktan hemen sonra yapılmalıdır.Numuneleri uzun süre oda sıcaklığında bırakmayın.Uzun süreli depolama için numuneler -20°C'nin altında tutulmalıdır.

4. Testten önce numuneleri oda sıcaklığına getirin.Dondurulmuş numuneler testten önce tamamen çözülmeli ve iyice karıştırılmalıdır.Numuneler tekrar tekrar dondurulup çözülmemelidir.

Test prosedürü

Testten önce testin, numunenin, tamponun ve/veya kontrollerin 15-30°C (59-86℉) oda sıcaklığına erişmesine izin verin.

1. Poşeti açmadan önce oda sıcaklığına getirin.Test cihazını kapalı poşetinden çıkarın ve mümkün olan en kısa sürede kullanın.Test cihazını temiz ve düz bir yüzeye yerleştirin.

2. IgG/IgM Testi için: Damlalığı dikey tutun ve 1 damla numuneyi (yaklaşık 10μl) test cihazının numune kuyucuğuna (S) aktarın, ardından 2 damla tampon (yaklaşık 70μl) ekleyin ve zamanlayıcıyı başlatın.Aşağıdaki resme bakın.

3. NS1 Testi için: Damlalığı dikey tutun ve 8~10 damla serum veya plazmayı (yaklaşık 100μl) test cihazının numune kuyucuğuna (S) aktarın, ardından zamanlayıcıyı başlatın.Aşağıdaki resme bakın.

4. Renkli çizginin/çizgilerin görünmesini bekleyin.Sonuçları 15 dakikada okuyun.Sonucu 20 dakika sonra yorumlamayın.

Sonuçların yorumlanması

Pozitif:

IgG/IgM Testi için: Membran üzerinde kontrol çizgisi ve en az bir test çizgisi belirir.T2 test çizgisinin görünümü, dang hummasına özgü IgG antikorlarının varlığını gösterir.T1 test çizgisinin görünümü, dang hummasına özgü IgM antikorlarının varlığını gösterir.Ve hem T1 hem de T2 çizgisi görünüyorsa, bu hem dang hummasına özgü IgG hem de IgM antikorlarının varlığını gösterir.Antikor konsantrasyonu ne kadar düşükse sonuç çizgisi o kadar zayıftır.

NS1 Testi için: İki çizgi belirir.Kontrol çizgisi bölgesinde (C) her zaman bir çizgi görünmeli ve test çizgisi bölgesinde başka bir belirgin renkli çizgi görünmelidir.

Olumsuz:

Kontrol bölgesinde (C) renkli bir çizgi beliriyor. Test çizgisi bölgesinde belirgin bir renkli çizgi görünmüyor.

Geçersiz: Kontrol satırı görüntülenemiyor.Yetersiz numune hacmi veya yanlış prosedür teknikleri, kontrol hattı arızasının en olası nedenleridir.Prosedürü gözden geçirin ve testi yeni bir test cihazıyla tekrarlayın.Sorun devam ederse test kitini kullanmayı derhal bırakın ve yerel distribütörünüzle iletişime geçin.